贴壁细胞悬浮培养的小妙招

怎么让贴壁细胞悬浮培养？波洛沙姆应它完美的剪切力占首功，为什么让贴壁细胞悬浮培养，有以下几大好处：

1.减少耗材的过度使用

2.能最大量的得到细胞

3.保持提取的蛋白的一致性

对于贴壁细胞（需要2-4周）：

1. 细胞达到最大密度时，开始适应性训练；

2. 胰酶消化贴壁细胞，350×g离心5min收集细胞，用含5％血清的无血清培养基重悬，使细胞密度达到4×10^5cells/ml。

3. 培养细胞至达到最大密度；

4. 重复2 - 3步骤，依次在无血清培养基中加入2％，1%，0.5%和0.1%的血清，进行细胞培养；如果细胞的存活率低于80％，那么需要恢复至前一个血清的含量，或者采用更加细化的递减含量。

5. 直到完全使用无血清培养基培养细胞。

启达生物提供Suspension™系列培养基，培养基为无血清五动物组分配方，不含动物蛋白，采用小分子、大分子化合物和少量激素组成，适用于大规模的反应器培养，无血清培养会有以下优势：

● 无血清培养基批次一致性高，可以省去对培养基进行预筛选的工作。

● 无血清培养基成本降低，价格波动不大。如果用血清，那么很容易受到周围环境的影（如天气干旱时，血清产量降低），而使血清价格有所调整。

● 无血清培养基不含有丝分裂原抑制剂，可以促进细胞增殖。

● 无血清培养基可以降低病毒、真菌、支原体等微生物污染的可能性。

● 无血清培养基组分稳定，可大量配制。

● 无血清培养基培养细胞，可以简化提纯和鉴定各种细胞产物的程序。

                          Suspension™ CHO (XF) 细胞悬浮培养基

含血清的细胞培养方式到无血清的培养方式如下：

对于悬浮细胞（需要2-4周）：

1. 当细胞密度达到最大时开始适应性训练；

2. 加入无血清培养基，使无血清培养基和正常培养基的比例变为原来的1/2

3. 当细胞密度达到最大时，加入无血清培养基，使细胞密度成为原来的1/5；

4. 培养细胞，如果细胞达到最大密度时，细胞的存活率大于85％，并且达到最大密度的时间与之前相近，那么细胞可以继续进行适应性训练；如果细胞显示生长缓慢或者存活率降低，那么需要重复2-3步鄹3次；

5. 可逐步提高无血清培养基的比例，直至细胞可以完全在无血清培养基中生长。