论怎么提取黑素细胞的小秘密

论怎么提取黑素细胞的小秘密

实验狗总是有做不完的实验，这不，才做了周细胞，黑素细胞又爬山涉水的赶着趟过来了，拿起手术剪，镊子等实验小帮手开始操作吧！

组织样本清理过程

a）取带有毛孔的皮肤，1cm×1cm大小，一定要带毛囊，酒精浸泡1分钟后，用预冷的49%PBS+49%MEM+2%PSN冲洗两次，再去除皮下结缔组织；

b)用眼科剪将皮肤剪成0.2cm×0.5cm大小的皮肤块，放入20mL的Dispase II酶消化液中，一定要浸没，4℃过夜消化14-16h；

c)第二天观察组织切口表皮和真皮有分开迹象时将皮肤放入干燥的培养皿中用眼科镊揭下表皮，若表皮不易揭下，再次将皮肤放入DispaseII酶中，37℃孵育15-30min；

d)将揭下的表皮收集到35mm干燥的培养皿中，加入1ml的0.25％胰酶37℃消化8min；

e)加入2mL血清终止消化，吹打数次，200目细胞过滤网过滤，过滤后转入15ml离心管中，1000rpm离心5min；

f)加入2mL 黑色素完全培养基重悬，置入35mm培养皿中；

g)培养1h-2h后，显微镜观察黑素细胞贴壁，换液去掉悬浮的细胞，悬浮细胞为角质细胞，之后每隔2天换一次培养基

DAY5：黑素细胞及HMSA免疫荧光染色

是不是很简单，不只是提取了黑素还拿捏了角化细胞？

还有一个秘密想要告诉您

使用以下神器，轻松得到你想要的细胞

MM黑素细胞培养基：

1. 低血清组分，血清含量为1%

2. 添加角化细胞堵断小分子化合物及促黑素细胞生长的蛋白让黑素细胞自由生长

3. 培养基不含TPA致癌小分子，避免黑色细胞在扩增过程中的癌化

KGM角化细胞培养基

1. 套装组成，使用方便；

2. 采用ITS+E替代BPE无血清的组分，减少动物源蛋白干扰；

3. 经多种角化细胞株及原代细胞测试，组分稳定，细胞生长状态良好