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细胞衰老实验检测很多种,就看你选哪一种,来看看我选的吧

来源:启达生物  浏览量:672  发布时间:2024-08-13

细胞衰老实验检测很多种,就看你选哪一种,来看看我选的吧

细胞衰老研究对于理解生物体老化过程、预防和治疗与年龄相关的疾病具有重要意义。通过研究细胞衰老的机制,可以揭示导致细胞功能下降和组织退化的分子和遗传因素。这有助于开发新的药物和治疗方法,以延缓衰老过程,提高老年人的生活质量。此外,细胞衰老研究还能为再生医学和组织工程提供理论基础,推动相关领域的发展

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A2780细胞的衰老染色

图片2.png 

MRC-5细胞的衰老染色

细胞的衰老实验怎么做?

熟读每一个步骤,轻松Skill细胞衰老的protocol!

1. 细胞培养:首先需要准备实验所需的细胞株,进行细胞的培养和传代,确保细胞处于良好的生长状态。

2. 细胞接种前在6孔培养板中预先放置灭菌的细胞片,每孔加入1×10^5cells37℃ 5% CO2条件下培养过夜,使细胞在细胞片上生长90%左右

3. PBS清洗细胞两次;

4. 2%多聚甲醛+0.2%异戊醛固定,3-5分钟

5. 洗涤细胞两次,每次2-3分钟

6. 加入X-Gal溶液以浸没细胞片为宜,37℃孵育4~8小时或过夜,用保鲜膜包被6孔培养板以防染液蒸发

7. 将细胞爬片按此顺序脱水、透明∶95%酒精I(2分钟→100%酒精I(5分钟)→二甲苯I(3分钟)PBS洗两次;

8. 树胶封片,室温避光孵育5分钟;

9. PBS清洗一次:

10. 计算衰老细胞:显微镜下观察每张片子镜下计数400个细胞,确定X-Gal染色阳性细胞(衰老细胞)在细胞群体中的所占的百分比即衰老细胞率(蓝染细胞数/总计细胞数×100%)

细胞衰老检测注意事项

①X-Gal溶液需要现用现配一般使用的浓度4mg/ml

②细胞固定时间过长或固定之后清洗不干净,均会影响后续的酶反应。

 

细胞衰老的检测有很多种,X-Gal检测是最实惠的,除此之外还有PCR,流式多因子检测,抗体芯片检测等,同学们自己去探索啦,每周学一点,总会有进步。

 

 


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