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原代细胞永生化
来源:启达生物 浏览量:1837 发布时间:2020-11-06
原代细胞因它可以模仿人体的新陈代谢逐日成为科研学者青睐的研究工具,但是原代细胞曾是出了名的难培养,需要耗费大量的时间、成本和资源。即使细胞捱过了极其严苛的解离步骤,但污染仍然是一个隐患,有可能让几天的成果化为乌有。此外还存在其他细胞污染、生长缓慢以及数量有限的问题。
细胞系因容易培养且产量可观而成为研究首选。然而,它们并不完美。细胞系会不断突变。连续传代导致它们的基因型和表型发生变化。有时候,它们已经变得面目全非。一个研究小组曾经发现,HEK293细胞系的腺病毒转化产生的细胞更接近未成熟神经元,而不是人胚肾细胞。
于是hTERT、PSC和iPSC来源的永生化细胞应运而生,他们 并不是真正的原代细胞,但是他们却能表达出大部分原代细胞应有的特性例如:强制表达hTERT让原代细胞能维持足够的端粒长度,避免增殖性衰老。hTERT诱导的原代细胞不但具有连续传代的能力,而且没有染色体不稳定性。这种细胞可以扩增,也可以冷冻、保存和解冻,以适应实验的时间安排,但是它只是延缓了细胞的衰老,增加了传代的次数,并不是表示细胞可以像hela一样“长生不老”。
PSC和IPSC也是一样的,PSC的真正价值在于能够从一种细胞分化成多种细胞类型。iPSC让研究人员能够采集轻松获取的细胞,并将它们转变为不易获取的细胞,但是预实验和验证实验结果一般建议使用原代细胞,因为没有经任何修饰的细胞才能得到实验最为精确的数据。
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