简单实用，脐带间充质干细胞的提取

间充质干细胞存在于人体的许多器官和组织中，它们具有再生和分化潜能，在修复体内受损组织方面起着重要作用，成体间充质干细胞已在骨髓、脂肪、血液、肠道、皮肤、 肌肉、脐带等组织中被鉴定，其存在着数量有限、分离涉及侵入性、诱发供体部位疾病、捐助者异质性等缺点，这些问题使得研究者对围产期干细胞的研究产生了兴趣，看看脐带间充质干细胞怎么提取吧

1、取健康、自然顺产的胎儿脐带首先剪为3cm的片段，然后用PBS清洗数次洗掉残留血液，去除两条动脉和一条静脉，剪碎至Imm3左右的小块。

2、加入PBS清洗，800rmp离心5分钟去除上清，重复清洗两遍。

3、加入20ml I型胶原酶消化2h，消化过程中间断混匀组织块以促进消化。

4、消化完成后800rmp离心5min去除上清,加入PBS清洗,800rmp离心5min清洗两遍。

5、消化后的组织块移到3瓶含5ml培养基的25ml培养瓶中放入培养箱37 ℃，5%C02条件下培养。

6、培养瓶前3天不要移动以使组织块贴壁，第4天半量换液，第7天全量换液，

第十二天细胞生长如下：

待整体汇合度到80%以上时，1：3传代 ，部分细胞传进孔板，进行免疫荧光检测,如下图:

   CD-90免疫荧光检测

 CD-29免疫荧光检测

Humsc细胞一般在P1代进行免疫荧光鉴定，P2代可进行冻存，使用MSCM低血清干细胞培养基细胞可达15倍增以上，MSCM培养基生长因子含有促干细胞生长组分以及抑制杂细胞生长的小分子化合物，使用MSCM培养基分离细胞时，血清需要提高到10%.

9.16起凡购买MSCM干细胞500ml系列培养基（启达生物，货号：P2001/P2005)一套赠Humsc细胞抵扣券500元，两套赠Humsc细胞抵扣券1000元，以此类推，多买多赠，一次性购10套可免费获赠Humsc细胞一株。