超简单的细胞黏附实验protocol

超简单的细胞黏附实验protocol

实验步骤：

Day 1 .用包被液（启达生物：SD0044）预铺六孔板，500µL-1ml/孔，以底面全部浸没为主，4℃过夜后，PBS 洗3遍，再用 1% BSA于37 ℃封闭1h，PBS清洗3遍；

Day 2.将培养好的细胞消化下来，用1ml完全培养基重悬细胞，用血球计数板计数，调整浓度为5*10^5cells/mL，分别接种于预铺包被液的6孔板中，每个孔2*10^5cells，每组设3个复孔，每孔加1ml无抗培养基，37℃孵育1-8h(孵育时间以细胞正常培养时贴壁的速度参考）；孵育时间到后，再使用PBS洗去未黏附的细胞.

检测：

5%戊二醛于4 ℃固定0.5 h，PBS洗3遍；0.1%的结晶紫染色，室温静止0.5 h，PBS洗3遍，每孔加入500μL 10%的乙酸，5~10 min后用酶标仪检测595 nm的吸光度值，用以表示黏附细胞的多少。

可别小看了细胞粘附实验，它无处不在，可用于药物开发与筛选、肿瘤生物学研究、组织工程与再生医学细胞间相互作用研究、疾病模型和病理研究、免疫学研究、细胞迁移与伤口愈合研究、血管生成研究等等，

相关产品：

细胞包被液 货号：SD0044

细胞培养瓶或者培养皿包被使用，含有纤维粘连蛋白，促细胞贴壁基质和明胶，主要协助细胞粘附、促进生长、引导迁移、调控分化、维持表型、防止细胞凋亡等作用，适合大部分贴壁不牢的原代细胞，细胞株，肿瘤细胞等