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产品描述/Products Description
Suspension™ MDCK系列悬浮培养基是一款支持BHK细胞悬浮培养的培养基 ,适用于MDCK悬浮培养和大规模的反应器培养,它由100多种化合物组成, 不含有蛋白,但是含有少量激素,使用柠檬酸铁等替代转铁蛋白在细胞生长中的应用,使用Suspension™系列悬浮细胞培养基,可培养的细胞最大密度在10×10^6 cells/ml 以上,培养基可用来转染细胞以提高转染效率,抗生素是独立出来的小分装 ,在细胞转染的时候可不加以提高转染效率
培养基组成:500ml Suspension™ MDCK(XF)悬浮细胞培养基(启达生物:SP01),5ml G/A(启达生物 :SD0038)
无血清培养基的优势如下:
● 无血清培养基批次一致性高,可以省去对培养基进行预筛选的工作。
● 无血清培养基成本降低,价格波动不大。如果用血清,那么很容易受到周围环境的影响(如天气干旱
时,血清产量降低),而使血清价格有所调整。
● 无血清培养基不含有丝分裂原抑制剂,可以促进细胞增殖。
● 无血清培养基可以降低病毒、真菌、支原体等微生物污染的可能性。
● 无血清培养基组分稳定,可大量配制。
● 无血清培养基培养细胞,可以简化提纯和鉴定各种细胞产物的程序。
操作步骤:
细胞从常规培养基到无血清培养基的适应性训练方法根据细胞的类型分为2种:
对于悬浮细胞(需要2-6周):
1. 当细胞密度达到最大时开始适应性训练;
2. 加入无血清培养基,使无血清培养基和正常培养基的比例变为原来的1/2
3. 当细胞密度达到最大时,加入无血清培养基,使细胞密度成为原来的1/5;
4. 培养细胞,如果细胞达到最大密度时,细胞的存活率大于85%,并且达到最大密度的时间与之前相近,那么细胞可以继续进行适应性训练;如果细胞显示生长缓慢或者存活率降低,那么需要重复2-3步鄹3次;
5. 可逐步提高无血清培养基的比例,直至细胞可以完全在无血清培养基中生长。
对于贴壁细胞(需要2-6周):
1. 细胞达到最大密度时,开始适应性训练;
2. 胰酶消化贴壁细胞,350×g离心5min收集细胞,用含5%血清的无血清培养基重悬,使细胞密度达到4×10^5cells/ml。
3. 培养细胞至达到最大密度;
4. 重复2 - 3步骤,依次在无血清培养基中加入2%,1%,0.5%和0.1%的血清,进行细胞培养;如果细胞的存活率低于80%,那么需要恢复至前一个血清的含量,或者采用更加细化的递减含量。
5. 直到完全使用无血清培养基培养细胞。
声明:产品仅供科研使用
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