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产品描述/Products Description
间充质干细胞成骨分化试剂盒是自主研发的一款用于人间充质干细胞诱导成骨分化的低血清培养基,使用此培养基培养细胞,可用于骨髓、脐带、脂肪等组织来源的间充质干细胞的诱导成骨分化。
培养基配方:
基础培养基:500ml (P1300),细胞生长因子(MSGCS) 5ml (P2002),成骨细胞诱导因子 5ml (P1303),胎牛血清:25ml(SD0200),G/A:5ml(SD0038)
备注:100ml瓶装无套件,为整瓶配制。
l 诱导分化程序简单便捷。
l 诱导成骨细胞效率高。
骨髓间充质干细胞诱导(Day12)
诱导成骨步:
一、 使用细胞细胞包被液包被细胞培养板,将传代或复苏冻存的间充质干细胞接种到6孔板上,密度为2×105 -3×105 cells/cm2或2×105 -3×105 cells/孔,置于37℃,5% CO2培养箱中培养,当细胞汇合度达到80%-90%时,小心的将孔内间充质干细胞培养基吸掉,向6孔板中加入2mL间充质干细胞成骨分化培养基,以此记为第0天;
注意:成骨分化容易使细胞卷起,成骨分化时应使用包被液包被细胞培养板,可使用细胞包被液 货号:SD0044进行细胞包被。
二、每隔1-2天更换新鲜的间充质干细胞成骨分化培养基;
注意:为防止成骨细胞脱落,建议成骨过程中出现大量钙结节之后,换液形式变为每天一次半量换液。
三、 诱导14-21天期间,视细胞的形态变化及生长情况进行染色。
四、诱导成骨分化结束后,吸掉6孔板中的成骨分化培养基,用PBS冲洗1-2次。每孔加入1 mL细胞固定液,固定10~30 min;
五、 吸掉细胞固定液,PBS冲洗2次。每孔加入2 mL成骨检测染液,染色3-5 min;
六、 吸掉成骨检测染液,用PBS冲洗2-3次;
七、将培养板置于显微镜下观察成骨染色效果
声明:产品仅供科研使用。
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